（健康快讯）在P3实验室， 新冠病毒被这样“揪出来”

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最近在武汉，检查人员正在检查采集样本的标本信息。新华社记者成敏照片

在广东省第二人民医院p3实验室的标本处理室，研究人员正在进行样品开放和核酸提取。照片由受访者提供

核酸检测是新冠肺炎诊断肺炎的“金标准”，检测过程中的每一个环节都很微妙，容不得半点马虎。

“这是一个‘零距离’接触病毒的地方。整个实验室完全密封，房间处于负压状态。我们喜欢用‘三流’来形容，即人、物流、空气的单向流动，以保证里面的污染物不会泄漏出去，造成污染。”广东省第二人民医院p3实验室主任林建国说。他说的“这里”是指p3实验室(生物安全三级实验室)。就是在这里，广东省第二人民医院每天进行400多项SARS-CoV-2核酸检测。

现在，让我们揭开广东省第二人民医院p3实验室的神秘面纱，看看病毒是如何在这里“被发现”的。

测试过程中的每个环节都很好

核酸检测是新冠肺炎诊断肺炎的“金标准”，检测过程中的每一个环节都很微妙，容不得半点马虎。

实验室的检测过程可以分为五个步骤:样品进入“转移窗口”——灭活处理——打开盖子提取核酸——判断扩增反应结果——高压灭菌。

第一步，采集的测试样本，如咽拭子或肛门拭子，在进入p3实验室前必须进入一个特殊的窗口——“转移窗口”。该窗口也称为空气锁，空空气锁，与空空气有关，顾名思义，该转移窗口有不能同时打开的双扇门，以确保样品转移过程中带入的空气体被隔离在双扇门中，并确保实验室外的环境不受污染。这也是“三流”中的“物流”，样本就是从这里开始在实验室短暂的生命的。

第二步，将样品在水浴中于56℃灭活半小时，使病毒蛋白不再具有生理活性，丧失感染、致病和繁殖能力，使实验者在检测样品时相对安全，但病毒蛋白的基因序列不受影响。

第三步，开样和核酸提取。

第四步，将提取的核酸送到核酸检测室，即将放在仪器上。将提取的核酸加入扩增试剂中，用荧光pcr仪进行RT-pcr反应。首先，提取的核酸被转录成脱氧核糖核酸，然后以脱氧核糖核酸为模板扩增特定的位点，在不同的温度下进行变性、退火和延伸。每个周期采集荧光值，45个周期后绘制荧光曲线，耗时约110分钟。实验者根据荧光曲线分析判断阴性和阳性结果。

第五，高压灭菌后，实验过程中产生的污水作为相关的常见医疗废物处理。“物流”到此为止。

测试结果经过了多次比较和复查

任何环节的问题都有可能导致检测结果的错误。因此，为了保证检测质量，检测结果会进行大量的比较和复检。

据介绍，检测前已经开始了检测质量的保证措施，采集样本的医务人员必须经过严格的培训和评估后才能上岗。样品的质量与采集技术密切相关，每一个动作过程都必须按规定进行。样品采集后的押运工作应由专人按照严格的程序送到实验室。

在测试过程中，实验者始终保持谨慎的态度进行每次测试，不遗漏任何可疑样本。对于可疑样品，将选择不同的试剂进行审查和测定；其次，根据该过程，将在每一批实验中随机插入三个以上的空白对照，并对阳性样本进行病毒基因测序和比较，以防止“假阳性”的发生。

测试结束后，实验室会随机抽取测试样本送第三方实验室进行测试，并对数据进行对比分析。同时，实验室还将参与卫生部门和广东临床中心的逐室评估，以确保测试的准确性。

病毒“侦察”业务出色而英勇

在操作中，实验者需要“一个个揭开盖子，打开盖子加样本，提取核酸”，这无疑是与病毒的直接对抗。核酸检测的目的是高效、有序和安全。其中安全是最重要的，尤其是实验者的安全。

因此，进入p3实验室，实验人员应先在洁净区穿上中间防护服，通过缓冲室进入实验室负压车间，在此进行标本处理、核酸提取和检测。完工后，进行空室和表面消毒，然后依次脱下防护服，通过淋浴室换衣，返回清洁区。这些步骤必须严格执行，不能遗漏。

目前，广东省第二人民医院p3实验室检测团队有21人，实行一天三班制。在爆发阶段，为了满足检测需求，缩短检测时间，实验室在原有团队的基础上，从风湿免疫科和血液科实验室抽调人员。这些病毒“侦察兵”中超过70%拥有硕士或以上学位，他们都接受过分子生物学培训，并拥有聚合酶链反应(pcr)证书。

实验室严格遵守《新型冠状病毒诊疗方案》和生物安全要求。检查员应在p3实验室的负压密封空室佩戴三级防护设备。他们5个小时不应该吃喝，甚至穿成人纸尿裤来解决上厕所的问题。他们需要随时面对因负压差和设备紧张而导致的头晕和呕吐。

“不像病房里打架的医护人员，他们藏在实验室里，每天都与病毒密切接触，是人们看不到的‘前线’。”林建国说。

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生物安全实验室有几级

生物安全防护实验室是指实验室的结构和设施、安全操作程序和安全设备，能够保证工作人员在处理病原微生物及其毒素时不会被实验对象感染，保证周围环境不受污染。

根据微生物及其毒素的危害程度，生物安全实验室分为四级，第一级最低，第四级最高。生物安全防护一级实验室一般适用于对健康成人无致病作用的微生物；第二级适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物；第三级适用于主要通过呼吸道感染严重甚至致命疾病的病原微生物或其毒素；四级适用于对人体高度危险、通过气溶胶传播或传播途径不明，且无有效疫苗或治疗方法的病原微生物或其毒素。

20世纪80年代，为了研究流行性出血热病毒的传播机制，我国建立了第一个p3实验室。2003年非典的爆发，是我国高等级生物安全实验室发展的分水岭。非典爆发后，我国出台了国家生物安全实验室建设体系规划。一些p3实验室已经投入运行，p4实验室已经建成。

2015年1月31日，中国首个p4实验室和中国科学院武汉国家生物安全实验室在武汉建成。2018年1月4日，实验室通过国家卫生计生委(现国家卫生计生委)高致病性微生物实验活动现场评估，成为国内乃至亚洲首个正式投入运行的p4实验室。

目前，国际上p4实验室的建设正呈现加速发展的趋势。这与全球化时代严重传染病的危险性和国家生物安全战略有关。据不完全统计，22个国家和地区的60家机构拥有p4实验室。但由于p4实验室的相关内容涉及国家生物安全核心机密，一些国家没有披露数据。

经过多年的发展，我国已有数十个p3、p4实验室，为我国重大传染病防控、生物预防和产业发展做出了重要贡献。(记者龙跃梅通讯员陈淑桦王蒙)